KIT ÉLECTROPHORÈSE DE L'ADN N°3
“ Digestion et localisation de sites de coupure ”
Composition :
Pour réaliser 4 gels (4 puits de dépôt + 4 puits d’entrainement) chacun soit un total de 16 dépôts d’ADN
ou 2 gels à 8 puits
1,6 g d’agarose (pour 4 gels)
100 ml de tampon TBE10x pH = 8,3 à diluer 10 fois pour obtenir 1000 ml de tampon
Flacon pour réaliser l’agarose
210 μl d’ ADN de phage lambda
8 μl d’enzyme de restriction XhoI à digestion rapide
8 μl d’enzyme de restriction EcoRI à digestion rapide
8 μl d’enzyme de restriction HindIII à digestion rapide
18 μl de tampon pour enzyme de restriction à action rapide
250 μl de bleu de dépôt
400 ml d’azure A
Notice technique et pédagogique
CONSERVATION 6 MOIS
Au congélateur : ADN
Au réfrigérateur : colorant Azure A (à l’abri de la lumière), tampon TBE, eau stérile
DÉLAIS
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Préciser la date exacte du TP sur le bon de commande.
MATÉRIEL NÉCESSAIRE
Cuve à électrophorèse d’ADN (pour gel immergé)
Générateur 70-110 V, 20 mA
Bain marie ou micro-ondes pour réalisation du gel d’agarose
Bain-marie thermostaté pour digestion enzymatique à 37°C
puis inactivation à 80°C - Gants
Micropipettes de 5 à 50 μl et cônes adaptés
Objectifs cognitifs :
Ce kit peut compléter le kit « électrophorèse de l’ADN, carte de restriction et dépistage
Manipulation proposée :
Digestion d’ADN de phage lambda par une enzyme XhoI, EcoRI et HindIII à action rapide (5 minutes)
(Faite par les élèves)
Electrophorèse sur gel d’agarose à 8 puits des ADN de phage lambda et de phage lambda digéré par XhoI, par EcoRI et par HindIII
Interprétations des résultats en s’appuyant sur la notice pour trouver la taille des bandes d’ADN obtenues et localiser les sites de coupure
Prix : 43,00 € |
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